簡(jiǎn)介:RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)是克隆基因全長(cháng)基因最常用的方法之一,目前RACE技術(shù)主要有以下兩種:
表:本公司5’-RACE和SMART技術(shù)比較
5’-RACE技術(shù)環(huán)節 |
本公司5’-RACE技術(shù) |
SMART技術(shù) |
Total RNA需要量 |
較多(5-10 ug) |
較少(0.5-1 ug) |
合成周期 |
較長(cháng)(一般1-2天) |
較短(30 min-1 hr) |
5端完整性 |
完整 |
絕大多數基因5端不完整 |
對客戶(hù)建議 |
選擇該技術(shù) |
獲取不完整的cDNA序列,該技術(shù)在5’-RACE實(shí)驗中應該淘汰。 |
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技術(shù)優(yōu)勢:
(1)????? 修飾的5’-RACE技術(shù):在經(jīng)典5’-RACE基礎上,進(jìn)行了諸多改進(jìn),如加入增強劑,選取耐高溫、高效逆轉錄酶,以及縮短每步RNA沉淀過(guò)程,減少RNA降解等方式,有效實(shí)現了超長(cháng)、特殊結構5’-RACE片段的獲??;
(2)????? 原核生物5’-RACE獲?。?/span>原核生物由于沒(méi)有5-Cap結構,本公司采用特殊的加帽酶,成功實(shí)現了對原核生物5-UTR成功獲取,確定了原核生物大量的功能基因以及基因轉錄起始位點(diǎn)。
(3)????? 長(cháng)鏈非編碼5’-RACE(lncRNA 5-RACE):本公司通過(guò)優(yōu)化,完成了組織細胞大量lncRNA 5’-RACE實(shí)驗,發(fā)現了這些lncRNA不同的剪接形式。
(4)????? 已克隆5-RACE物種:
哺乳類(lèi):人,大鼠和小鼠lncRNA 5’-RACE,豬,羊等
鳥(niǎo)類(lèi):雞,鴿子,半番鴨,白鴨,鵝等
兩棲和爬行類(lèi):甲魚(yú),黑斑蛙,蜥蜴等
水生生物:銀鯧,羅非魚(yú);錦鯉,黑鯛,大黃魚(yú),羅氏沼蝦,中國對蝦,漠斑牙鲆,牡蠣等
無(wú)脊椎動(dòng)物:蚯蚓,甲蟲(chóng)等
植物:海帶,紫菜,紫云英,香草,云杉,菊花,白楊,獼猴桃,芒果等
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客戶(hù)須知:
5’-RACE服務(wù)項目 |
周期 |
最終提供客戶(hù)資料 |
原核基因5’-RACE |
14-20個(gè)工作日 |
詳細實(shí)驗報告,原始測序結果,菌液等 |
真核基因5’-RACE |
14-20個(gè)工作日 |
詳細實(shí)驗報告,原始測序結果,菌液等 |
LncRNA 5’-RACE |
14-20個(gè)工作日 |
詳細實(shí)驗報告,原始測序結果,菌液等 |
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案例:
圖:使用本公司5’-RACE方法獲取了不同生物5’-RACE PCR電泳結果
(A1: 人lncRNA某基因:2000bp;B1: 海帶某基因 2700 bp;C1:羅氏沼蝦某基因 750bp;大黃魚(yú)某基因 D1: 1900 bp)
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