5’-RACE克隆技術(shù)

簡(jiǎn)介RACERapid Amplification of cDNA Ends)是克隆基因全長(cháng)基因最常用的方法之一,目前RACE技術(shù)主要有以下兩種:

表:本公司5’-RACESMART技術(shù)比較

5’-RACE技術(shù)環(huán)節

本公司5’-RACE技術(shù)

SMART技術(shù)

Total RNA需要量

較多(5-10 ug

較少(0.5-1 ug

合成周期

較長(cháng)(一般1-2天)

較短(30 min-1 hr

5端完整性

完整

絕大多數基因5端不完整

對客戶(hù)建議

選擇該技術(shù)

獲取不完整的cDNA序列,該技術(shù)在5’-RACE實(shí)驗中應該淘汰。

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技術(shù)優(yōu)勢

(1)????? 修飾的5’-RACE技術(shù):在經(jīng)典5’-RACE基礎上,進(jìn)行了諸多改進(jìn),如加入增強劑,選取耐高溫、高效逆轉錄酶,以及縮短每步RNA沉淀過(guò)程,減少RNA降解等方式,有效實(shí)現了超長(cháng)、特殊結構5’-RACE片段的獲??;

(2)????? 原核生物5’-RACE獲?。?/span>原核生物由于沒(méi)有5-Cap結構,本公司采用特殊的加帽酶,成功實(shí)現了對原核生物5-UTR成功獲取,確定了原核生物大量的功能基因以及基因轉錄起始位點(diǎn)。

(3)????? 長(cháng)鏈非編碼5’-RACElncRNA 5-RACE):本公司通過(guò)優(yōu)化,完成了組織細胞大量lncRNA 5’-RACE實(shí)驗,發(fā)現了這些lncRNA不同的剪接形式。

(4)????? 已克隆5-RACE物種:

哺乳類(lèi):人,大鼠和小鼠lncRNA 5’-RACE,豬,羊等

鳥(niǎo)類(lèi):雞,鴿子,半番鴨,白鴨,鵝等

兩棲和爬行類(lèi):甲魚(yú),黑斑蛙,蜥蜴等

水生生物:銀鯧,羅非魚(yú);錦鯉,黑鯛,大黃魚(yú),羅氏沼蝦,中國對蝦,漠斑牙鲆,牡蠣等

無(wú)脊椎動(dòng)物:蚯蚓,甲蟲(chóng)等

植物:海帶,紫菜,紫云英,香草,云杉,菊花,白楊,獼猴桃,芒果等

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客戶(hù)須知:

5’-RACE服務(wù)項目

周期

最終提供客戶(hù)資料

原核基因5’-RACE

14-20個(gè)工作日

詳細實(shí)驗報告,原始測序結果,菌液等

真核基因5’-RACE

14-20個(gè)工作日

詳細實(shí)驗報告,原始測序結果,菌液等

LncRNA 5’-RACE

14-20個(gè)工作日

詳細實(shí)驗報告,原始測序結果,菌液等

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案例:

圖:使用本公司5’-RACE方法獲取了不同生物5’-RACE PCR電泳結果

A1: lncRNA某基因:2000bp;B1: 海帶某基因 2700 bp;C1:羅氏沼蝦某基因 750bp;大黃魚(yú)某基因 D1: 1900 bp

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